Innhold
Kromatografi brukes mye i kjemiske laboratorier for å bestemme identiteten til en ukjent komponent. Denne komponenten flyter gjennom kolonneinnpakningsmaterialet og samhandler med partiklene. Samspillet mellom partiklene og komponentene i prøven er basert på tiltrekningen eller løseligheten mellom dem. Molekyler som ikke har noen interaksjon med partiklene i kappematerialet, får passere gjennom det uten hindring. Tiden det tar for molekylene å passere fra injeksjonspunktet til systemet ved den maksimale toppen av et ikke-reaktivt molekyl, er kolonnens dødtid.
Trinn 1
Forsterk den ukjente prøven med en liten mengde av en forbindelse som ikke blir beholdt av kolonnematerialet. Forbindelsen vil passere gjennom kolonnen uten å samhandle med innpakningsmaterialet i kolonnen.
Steg 2
Legg sprøyten med ca. 20 mikroliter av prøven, og sett sprøytenålen inn i injeksjonsporten. Last prøvesløyfen fra ventilen ved å tømme sprøyten i ventilen.
Trinn 3
Slå på kromatografiinstrumentet og start mobilfasen. Denne fasen strømmer gjennom instrumentet og tar prøven gjennom kolonnen og detektoren som ender i en avfallsbeholder.
Trinn 4
Aktiver ventilen, som lar prøven komme inn i væskestrømningsbanen. Dette laster prøvekomponentene til toppen av kolonnen, og separasjonen begynner.
Trinn 5
Overvåke detektorens emitter signal og identifisere den første toppen i kromatografen. Forskjellen mellom injeksjonstid og maksimum for den første toppen, representert av forsterkningskomponenten, er dødtiden.
Trinn 6
Mål avstanden mellom injeksjonspunktet og den maksimale høyden på den første toppen. Multipliser avstanden med hastigheten på papiret eller aksen for å finne dødtiden.