Innhold
- Bakterielle agarplater
- Fylling av agarplater
- Lagring av agarplater
- Omvendt agarplater under lagring
- Omvendt agarplater under inokulering og inkubering
Agarplater brukes av forskere innen cellular og molekylærbiologi for å utføre forskningseksperimenter. De er plastisk petriskål fylt med agar blandet med næringsstoffer som tillater vekst av forskjellige mikroorganismer, som E. coli-bakterier. De betraktes som et vanlig forbruksmateriale i laboratorier, fordi de brukes raskt og vanligvis gjort internt, i store grupper, og deretter lagres.
Bakterielle agarplater
Disse plakkene produseres generelt av vitenskapelige teknikere som inkorporerer laboratorieklasse agar til et bakteriekulturmedium, slik som Luria-Bertani, SOC, Terrific eller metylenblått eosin. Fremstillingen av agarkulturmediet komplementeres av andre faktorer som kan være nødvendig for at bakteriene skal overleve eller et spesifikt antibiotikum (for eksempel ampicillin eller kanamycin) for å forhindre vekst av uønskede bakterier.
Fylling av agarplater
Agarplater fremstilles ved ganske enkelt å blande kombinasjonen av næringsstoffer og agar med en balansert pH-saltoppløsning og oppvarme dem til de smelter. Etter at det har blitt avkjølt, blir varmefølsomme kosttilskudd tilsatt. Denne blandingen helles mens den fortsatt er varm (og derfor flytende) på bunnen av hver Petriskål; det får lov til å tørke og størkne på en overflate hvor bakterielle suspensjoner kan plasseres. Etter at platene er helt kule, merkes de og lagres til bruk. Riktig oppbevaring av agarplater er viktig for å sikre at de riktige bakteriene dyrkes og ingen uønsket forurensning oppstår, noe som kan forstyrre eksperimentelle resultater.
Lagring av agarplater
Det finnes flere måter å lagre agarplater på, avhengig av hvilke kosttilskudd de inneholder. Hvis lystilskudd er tilgjengelige, lagres platene i mørket, pakkes i folie eller holdes i en lettisolert beholder. Platen lagres alltid i kjøleskap eller laboratoriekjøleskap ved 4 grader Celsius eller 39,2 grader Fahrenheit. Kaldelager kan forhindre eller minimere veksten av uønskede biologiske forurensninger.
Omvendt agarplater under lagring
Ubrukte brett er alltid omvendt eller vendt opp ned over lokkene under lagring. Dette gjøres for å forhindre fordampning oppstår hvis plakkene er lagret i lange perioder, noe som kan påvirke bakteriens veksteffektivitet, eller tillate multiplikasjon av uønskede organismer som for eksempel støpformer.
Omvendt agarplater under inokulering og inkubering
Når platene er fylt med en fuktig suspensjon av bakterier, bør den få lov til å fordampe litt før inkubering over natten. En moderat mengde fuktighet vil imidlertid fortsatt være tilstede. Hvis plakkene ikke er invertert under inkubering, vil bakteriene ikke kunne feste seg til agar på riktig måte, noe som enten forhindrer at de vokser og danner kolonier på en passende måte eller oppmuntrer til vekst av uønskede mikroorganismer. Noen av disse resultatene vil ugyldiggjøre eksperimentet. I tillegg kan kondens eller fuktighet forårsake scoring, noe som vil gjøre det svært vanskelig å velge og analysere separate kolonier. Når bakteriene danner kolonier, blir plakkene også lagret opp ned for å opprettholde fuktighetsnivåer.